علی عزلتی مقدم
علی عزلتی مقدم

علی عزلتی مقدم

DNA Microarray+تدریس

برای بدست آوردن الگوی بیان ژن یک سلول یا بافت تحت شرایط متفاوت از ریزآرایه های DNA یا ریز تراشه های DNA(dna microchips) نیز میتوان استفاده کرد

روش ریز آرایه های DNA بر اساس دورگه سازی و لکه گذاری نقطه ای (dot blot) بین mRNA و DNA مکمل آن یا Cdna میباشد

برای تهیه یک ریز تراشه دی ان آ بر روی یک شیشه با لام میکروسکوپی یا کوچکتر به وسیله یک روبات حجم بسیار کمی از انواع ژن های سلولی به صورت نقاط کوچک قرار داده میشود

در هر نقطه کمتر از یک نانو لیتر دی ان ا قرار داده میشود

به این ترتیب انواع دی ان آ مربوط به ژن های یک سلول به صورت نقطه های بسیار ریز بر روی شیشه قرار داده میشوند که ترتیب آن ها نیز بر روی ریزتراشه مشخص است

پس از نقطه گذاری DNA  به صورت کوالانسی به شیشه متصل میشود

از این ریزتراشه ها برای بررسی الگوی بیان ژن در یک سلول تحت شرایط فیزیولوژی یا پاتولوژی میتوان استفاده کرد

برای مثال برای بررسی الگوی بیان ژنی در یک سلول سرطانی در مقایسه با سلول طبیعی میتوان از ریزارایه استفاده کرد

به این ترتیب کل mRNA دو سلول مختلف را تلخیص کرده و از آن ها cDNA تهیه میکنند.سپس cdna را بارنگ های فلورسانس متفاوت نشان دار کرده و این CDNA ها را با دی ان آ ریزتراشه دورگه میکنند

بنابراین در یک ریزتراشه 4نوع نقطه مشاهده میشود.

1.نقاطی که با رنگ فلورسانس اول را دارند

2.نقاطی که رنگ فلورسانس دوم را دارند

3.نقاطی که هر دو CDNA نشان دار به آن متصل میشوند و ترکیب دو رنگ فلورسانس را دارند(به رنگ جدید دیده میشود)

4.نقاطی که با هیچ یک از CDNAها هیبرید یا دورگه نشده اند