ژن کلونینگ فرآیندی است که طی آن توالی مشخصی از DNA را جداسازی میکنند تا نسخههای یکسانی از آن را در محیط طبیعی ( سلول یا بافت زنده ) بدست آورند.
در بیولوژی مولکولی، واکنش زنجیره ای پلی مراز یا PCR، بمنظور تکثیر یک قطعه DNA مورد استفاده قرار میگیرد. تکنیک PCR در سال ۱۹۸۴ توسط کری مولیس (Kary Mullis) ارائه شده است. در این تکنیک، یک مولکول DNA میلیونها بار تکثیر میشود. در روش PCR سیکل های دمایی (Cycle) ایجاد میشود. در ابتدا با ایجاد حرارت و رساندن دمای محلول به نقطه ذوب DNA، دو رشته DNA از هم جدا میشوند.
ادامه مطلب ...ژن کلونینگ فرآیندی است که طی آن توالی مشخصی از DNA را جداسازی میکنند تا نسخههای یکسانی از آن را در محیط طبیعی ( سلول یا بافت زنده ) بدست آورند.
برای کلون کردن ژن قطعهای از DNA را از موجودی به موجود دیگر منتقل میکنند. سلولی را که منشا DNA از آن است را « دهنده » و سلولی را که آن را دریافت میکند « میزبان» میگویند.
کلونینگ ژن به روشهای مختلفی صورت میگیرد اما اساس همهی آنها به این صورت است که DNA هدف از سلول دهنده استخراج میشود و با کمک آنزیمهایی برش داده میشود و به داخل یک مولکول DNA حلقوی، که معمولاً یک پلاسمید است و نقش ناقل ( وکتور ) را دارد، وارد میشود. به این ترتیب یک مولکول DNA نوترکیب ساخته میشود. در مرحلهی بعد DNA نوترکیب را به سلول میزبان که اغلب نوعی باکتری میباشد منتقل میکنند. این مرحله را ترنسفورماسیون مینامند. DNA نوترکیب در سلول میزبان همانندسازی میکند و همراه سلول میزبان تکثیر میشود. سلولهای حاصل از تقسیم سلول میزبان اولیه، نسخههایی از DNA نوترکیب همانندسازی شده را به ارث میبرند. سلولهای باکتری به دنبال تقسیمات متعدد کلنی تشکیل میدهند و از آنجا که اعضای این کلونی حاوی یک یا چند نسخه از ژن مورد نظر ما که در DNA نوترکیب حمل میشود میباشد، میتوان گفت این ژن کلون شده است.
استخراج و برش ـ اولین گام در تولید DNA نوترکیب و سپس کلون کردن آن، استخراج و برش وکتور از سلول باکتری و DNA از سلول دهنده میباشد.
برای استخراج DNA از سلول دهنده، ابتدا باید «عصارهی سلولی» تهیه کرد. برای این منظور غشای سلول را متلاشی میکنند تا محتویات آن خارج شود سپس مخلوط حاصل را سانتریفیوژ میکنند تا زوائد آن تهنشین شود و مایع رویی که «عصارهی سلولی» است و حاوی DNA میباشد را جمع آوری میکنند. عصارهی سلولی علاوه بر DNA حاوی پروتئین و RNA نیز میباشد. با یکی از روشهای «تجزیهی آنزیمی پروتئین و RNA » یا «کروماتوگرافی تعویض یونی» DNA را از عصارهی سلولی تخلیص میکنند.
برای استخراج پلاسمید از سلول باکتری، بعد از تخلیص DNA باید پلاسمید را از DNA کرومزوم باکتری جدا کرد. برای این منظور از تکنیک « اولتراسانتریفیوژ » که بر مبنای شیب جرمی میباشد استفاده میکنند.
بعد از جداسازی، DNA سلول دهنده باید به قطعات کوچکتر بریده شود. برش DNA به قطعات کوچکتر را میتوان از طرق راههای مختلفی انجام داد از آن جمله ایجاد شکست در DNA با استفادها از امواج صوتی ( سونیکیت )میباشد. در این صورت طول قطعات حاصل از یک مولکول DNA با مولکول دیگر متفاوت خواهد بود چرا که شکست مولکول DNA به صورت تصادفی صورت میگیرد. کشف «آنزیمهای محدود کننده» (restriction enzymes) محققان را قادر ساخت تابتوانند قطعات با طول یکسان را از چندین مولکول DNA یکسان فراهم کنند. آنزیمهای محدود کننده باکتریها را قادر به دفاع در مقابل فاژها میکند. این آنزیمها مولکول DNA را درمحلهای ویژهای باترتیب نوکلوتیدی خاصی قطع میکنند. بنابراین برای آنکه یک مولکول DNA با این آنزیمها بریده شود، وجود توالیهای خاصی به نام «جایگاه محدود کننده» در مولکول DNA ضروری است و باید برای برش DNA به دنبال آنزیمی گشت که دارای بیش از ۲ جایگاه محدود کننده بر روی آن باشد.
همچنین مزیت دیگر استفاده از آنزیمهای محدود کننده این است که میتوان از همان آنزیم برای برش پلاسمید ناقل استفاده کرد و به این طرق امکان انطباق دو انتهای قطعهی ژن هدف با دو انتهای بریده شدهی پلاسمید را به سادگی فراهم کرد.
صامت و مصوت
صامت ها: صامت ها آواهایی هستند که در هنگام تولید آنها، هوا در نقطه ای از اندام های گویایی به مانع برخورد می کند؛ یا مجرای عبور هوا تنگ شده و ایجاد سایش می نماید.
بعبارت دیگر؛ صامت ها همان حروف یا الفبای زبان می باشند.(28 حرف)
مصوّت ها: مصوت ها آواهایی هستند که در هنگام تولید، بدون این که در مجرای گفتار به مانعی برخورد کنند به آسانی و با آزادی از دهان خارج می شوند.
مصوت ها در زبان فارسی شامل 6 صدا ( اَ- اِ- اُ- آ- ای- او) می باشند . که در عربی به صداهای کوتاه و کشیده تقسیم می شوند.
مصوت های کوتاه : اَ- اِ- اُ
مصوت های بلند : آ- ای- او
با یه شکلات شروع شد
من یه شکلات گذاشتم تو دستش
اونم یه شکلات گذاشت تو دستِ من
من بچه بودم،اونم بچه بود
سرمُ بالا کردم،سرشُ بالا کرد
دید که منو می شناسه.....خندیدم
گفت:دوستیــــم
گفتم:دوست ِ دوست
اسرار غیبت امام زمان (عج(
بدون شک غیبت آخرین حجت حق، حضرت مهدی علیهالسلام ، پدیدهای است که به این صورت هرگز در تاریخ اتفاق نیفتاده و طبیعی است که ذهن جستجوگر انسان، همواره این سؤال را مطرح کند که چرا چنین رُخدادی به وجود آمده است؟!
پاسخ به این پرسش همانند بسیاری از پرسشهای دیگر، نیازمند استمداد از کلام نورانی معصومان علیهمالسلام است و از این رو ما نیز با استفاده از بیانات ایشان به برخی حکمتها و علتهای این رویداد مهم اشاره میکنیم. و پیش از آن این نکته را متذکر میشویم که پنهان زیستی آخرین ذخیره الهی، بطور قطع از اسرار خداوندی است که پرنده اندیشه و فکر را توان پرواز تا آن قله رفیع نیست و اگر در این راه توفیقی رفیق گردد به یمن انفاس قدسی مقربان درگاه حق، ائمه معصومین علیهمالسلام است کهگاه گوشهای از پرده رازها به کناری زده در حد ظرفیت مخاطب و فهم او، حقایقی را آشکار میسازند
فلسفه غیبت :آنچه از منابع حدیثى و تاریخى بدست مى آید این است که خداوند در طول تاریخ بر سنتى استوارهمیشه اصرار داشته است و در میان هر قوم و ملتى آنرا به حرکت آورده و به گونه اى عینیت بخشیده است و آن پنهان سازى معلمان و مربیان راستین بشریت از دیده ها بوده است. از این قانون ژرف امت اسلام نیز استثنا نبوده و به غیبت آخرین امام خود گرفتار آمده است.
اینک با استفاده از روایات معصومین علیهمالسلام برخی از دلائل غیبت امام زمان علیهالسلام را بیان میکنیم.
1. حفظ جان امام زمان علیهالسلام
رجوع شود به ادامه مطلب
ادامه مطلب ...